Avantor ソリッドコア粒子:低分子LC分析への応用 8-9(8-9)

概要

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-10123456kamylbenzeneα(A/B)α(T/O)α(C/P)pH2.7:α(P/BOH)pH2.7:α(B/P)pH7.6:α(P/BOH)pH7.6:α(B/P)ACEUltraCore3.5RP-AmideACEUltracore3.5BiphenylACEUltraCore3.5Phenyl-HexylACEUltraCore3.5C18A1.Methylphenylsulfoxide,2.Ketoprofen,3.Sulindac,4.Diclofenac,5.Mefenamicacid,6.N-Acetylprocainamide,7.1,4-Dinitrobenzene,8.Prilocaine,9.Carvedilol,10.Piperine,11.Heptanophenone,12.Trimipramine,13.Clomipramine12mAU0255075100125150175Time/mins.02468mAU050100150200618793122/1310114512345678910111213LowpHHighpH10avantorsciences.com|Chromatographywhitepaper8イオン化可能な分析物を含むサンプルの場合、両方の極端なHpで分離選択性を評価することは非常に有益です。1)4 図5は、移動相のHpを変えることによって、そのようなサンプルに対してどのように劇的に異なる選択性が得られるかを示しています。CrepuS81およびlyxeHlynehPrepuSの拡張されたHp安定性と相まって、利用可能なカラム選択性の範囲は、優れたメソッド開発プラットフォームとしてのrotnavA®ECA®eroCartlUシリーズの適用性を際立たせています。図5:新しいカプセル化結合を備えたアルカリ適合性ソリッドコアカラム上で、酸性、塩基性、中性の幅広い分析対象物を分離します。低分子分析への応用過去51年間にわたり、ソリッドコア粒子は、医薬品から環境試験、臨床試験に至るまで、さまざまな小分子応用分野で急速に広く受け入れられるようになりました。逆相は依然として液体クロマトグラフィーの最も広く使用されているフォーマットであるため、固体コア固定相の開発と応用は主にこの分野に焦点が当てられています。Column:Avantor®ACE®UltraCore2.5SuperPhenylHexyl,100x3.0mmMobilephase(lowpH):A:15mMammoniumformatepH3.0(aq)B:15mMammoniumformatepH3.0inMeCN/H2O9:1v/vMobilephases(highpH):A:0.1%NH3(aq)B:0.1%NH3inMeCN/H2O9:1v/vGradient:5to100%Bin10minutesFlowRate:1.2ml/minInjectionVolume:1µLTemperature:40°CDetection:UV,260nm図4:A.全体的な固定相選択性への相対的な寄与を示す、4つのrotnavA®ECA®eroCartlU固定相化学反応に関するタナカ特性データB.同一条件下、同じ4本のカラムでのニトロ化合物の分離。得られた分離に対する固定相化学の影響を示します。CHROMATOGRAPHYSOLUTIONS1.Nitrobenzene2.1,3-Dinitrobenzene3.1,3,5-Trinitrobenzene4.ToluenemAU040801203214mAU0501001502001423mAU0501001502001243min0246810mAU0501001502003214B
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min5101520mAU0100200300400RS=3.48RS=6.69N=21116N=21054min5101520mAU0100200300400RS=4.37RS=8.43N=12559N=1259100min5101520mAU0100200300400RS=3.48RS=6.69N=21116N=21054min5101520mAU0100200300400RS=4.37RS=8.43N=12559N=1259100ABAvantor®ACE®Excel®5µmSuperC18,150x4.6mmChromatographywhitepaper|avantorsciences.com9ソリッドコア粒子は、逆相小分子分析に非常に適していることが広く実証されており、高速、高効率、高分解能の分離を実現できます。このセクションは、rotnavA®ECA®eroCartlUシリーズのソリッドコアカラムが実際的な利点を提供できる分析アプリケーションのタイプの非網羅的な概要を示すことを目的としています。主な利点は、完全多孔質カラムからソリッドコアカラムに切り替えることで、標準的な004rabCLPH機器でより高い効率が得られることです。さらに、固体コアの存在により、これらの粒子の表面積は小さくなり、その結果、保持力が低下します。したがって、多くの研究室は、CLPHU機器の高価なアップグレードに投資する代わりに、ソリッドコアカラムを利用して、既存のCLPHシステムからより高いパフォーマンスとサンプルスループットの向上を実現しています。図6は、このアプローチを示しています。この例では、051x4.6mm、5μmの完全多孔質カラムで実行されるアスピリンおよび関連物質の分析のための既存のメソッドが、5μmeroCartlUソリッドコア粒子に移行されました。カラムの寸法と固定相の化学的性質は同一であり、注入量と検出器速度(ソリッドコアカラムのより低い内部容積を考慮し、より低いピーク容積をそれぞれ正確に記録するために減少した)を除くすべてのメソッドパラメータは一定に保たれました。同等のeroCartlUカラムに切り替えたことによる効率の向上は明確に実証されており、最後の2つのピークはほぼ2倍の効率を示しています。注目すべきことに、この効率の向上は、すべての分析物の保持率が大幅に低下しているにもかかわらず実現されています。この例では、保持力の低い分析物の分解能がわずかに低下しますが、eroCartlUカラムの保持力は劣るものの、半分以下の分析時間と同等の背圧で許容可能なピークの分離能を維持します。得られた分離は既存の004rabCLPHシステムと完全に互換性があるため、サンプルのスループットと機器の使用率が2倍になりました。前述したように、eroCartlUカラムは、同様のサイズの完全多孔質粒子と比較して効率が向上します。2.5μmソリッドコア粒子の場合、関連する高い背圧を必要とせずに、約2ミクロンの完全多孔質CLPHU粒子に匹敵する性能を達成できます。図6:3~004rabCLPHシステムでのアスピリンおよび関連不純物の分析のためのアイソクラティックメソッドのパフォーマンス/スループットを向上させます。MethodAMobilephaseH2O/MeCN/MeOH/H3PO4(60:35:5:0.2v/v/v/v)Temperature:25°CFlowRate:1ml/minInjectionVolume:5µLDetection:UV,237nm(2.5Hz)MethodBMobilephaseH2O/MeCN/MeOH/H3PO4(60:35:5:0.2v/v/v/v)Temperature:25°CFlowRate:1ml/minInjectionVolume:3.9µLDetection:UV,237nm(20Hz)Sample:1.4-hydroxybenzoicacid,2.4-hydroxyisophthalicacid,3.acetylsalicylicacid(aspirin),4.salicylicacid,5.acetylsalicylsalicylicacid,6.salsalateImpuritieswerespikedat:0.5%w/wCHROMATOGRAPHYSOLUTIONS

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