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AHETPMobilephaselinearvelocity(u)CompositecurveC.uAB/uAB1.7µmFPP3µmFPPHETPMobilephaselinearvelocity(u)5µmFPP2.5µmSPP5µmSPPFPP=Avantor®ACE®FullyPorousParticlesSPP=Avantor®ACE®UltraCore(Solidcore)B1.7µmFPP0200400600800100000.515µmSPP1.52Pressure(bar)Flow(mL/min)5µmFPP3µmFPP2.5µmSPP(mlavantorsciences.com|Chromatographywhitepaper6実際には、最大のカラム効率は、図2の曲線の最小値である特定の線速度または流速で達成されます。したがって、B項とC項の両方を最小限に抑えるために、適切な流速で分離を実行することが重要です。流量が高すぎたり低すぎたりすると、効率が低下します。実験的に生成されたnavretmeeDプロットは、異なるサイズや形態の粒子を比較するのに役立ちます。図2Bは、より小さな粒子が充填されたカラムがより高い効率（つまり、より低いPTEH）を実現することを示しています。さらに、より小さな粒子の場合、最適な流量はより大きな粒子の場合よりも高くなります。固体コア粒子の曲線(図2B)を考慮すると、これらの粒子は完全に多孔質の対応する粒子と比較して明らかに性能上の利点があります。5μmソリッドコアと5μmPPFを比較すると、ソリッドコア粒子では劇的に低いPTEH値が得られます。図2:A.合成ファンディームター曲線と、式2で説明されている3つの項からの相対寄与B.rotnavA®ECA®全多孔質粒子(PPF)および固体コア粒子(PPS)について実験的に決定されたファンディームタープロットしたがって、ソリッドコア粒子は標準的なCLPHシステムで利用でき、背圧の問題を引き起こすことなく、従来の5μmの完全多孔質粒子よりもクロマトグラフィーの性能を向上させることができます。さらに、2.5μmソリッドコア粒子は、3μmPPFよりも大幅に高い性能を実現でき、完全多孔質の1.7μmCLPHU粒子の性能と同等です。ただし、図3に示すように、この向上した性能はより適度な圧力で得られます。ソリッドコア粒子の効率が高いということは、より短いカラム長を使用できることを意味し、分析時間の短縮と実験室の効率の向上につながります。以前は、物質移動（つまり、C項）の改善がソリッドコア粒子のより高い性能の原因であると広く述べられていました。しかし、より最近の研究では、小分子の場合、これは予想よりも寄与が少なく、主に原因はA項とB項の両方の減少であることが示されています。6、13、2)3図3:ECAソリッドコアと完全多孔質粒子が充填された05x2.1mmカラムの流量と全圧力のプロット。NCeM/H2O+0.1%AFTを使用したナプロキセンのアイソクラティック分析、k=01、04°C、λ=562mn2CHROMATOGRAPHYSOLUTIONSA項を最小限に抑えるには、rotnavA®ECA®シリーズなど、高品質の充填剤を含む十分に充填されたカラムを使用することが重要です。また、粒子が小さいほど流量が高くなると、曲線はより平坦になります。これは、超高速CLPHU分離を達成するためにさらに高い流量を利用できることを意味します。A項の削減は、固体コア粒子が充填されたカラムのより均一な充填床の可能性により、効率の向上に最も大きく貢献します。2)3ソリッドコアがカラムの内部デッドボリュームを減少させ（つまり、内部空隙率を減少させ）、その結果、長手方向の拡散係数項が減少するため、B項の寄与が減少すると、性能も向上します。6)
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Chromatographywhitepaper|avantorsciences.com7ただし、線速度との逆関係は、B項の改善が低流量でより大きな影響を与えることを意味します。(図2A)C項は減少しますが、小分子(<1,000aD)のバンドの広がりの減少にはわずかに寄与します。3)3大きな分子の場合、状況は多少異なります。大きな分子の拡散係数ははるかに低いため、バンド全体の広がりに対するC項の影響はより大きな影響を与えます。したがって、粒子への固体コアの導入によるC項の減少は、大きな分子にとって非常に有益であり、理論的にはシェルの厚さを減少させ、物質移動効果を最小限に抑えることでさらなる利益を得ることができます。4)3低分子用のROTNAVA®ECA®EROCARTLUシリーズ固体コア粒子が充填されたカラムは、幅広い応用分野における小分子の分析にうまく利用されています。小分子CL分析は通常、細孔サイズが約001Åの固定相を使用して実行されます。表1に、rotnavA®ECA®eroCartlUシリーズの小分子分析に利用できるすべてのソリッドコア固定相の詳細を示します。さらに、大きな生体分子の分析には、003および005Å幅の細孔eroCartlUOIB固定相の別製品も利用できますが、これについてはこの論文の範囲を超えています。53、6)3固定相の化学は、CL分離の全体的なクロマトグラフィー選択性を変えるための強力なパラメーターであるため、重要なメソッド開発ツールです。7)3メソッド開発中にさまざまな固定相の化学的性質(さまざまな有機溶媒、Hpなど)を評価することで、サンプル中のすべての分析物を正常に分離できる可能性が最大になります。したがって、rotnavA®ECA®eroCartlUシリーズでは、逆相条件下でさまざまな分析物/固定相保持メカニズムを提供するさまざまな固定相が利用可能です。固定相の選択性は、akanaT8)3アプローチやIRQP(tcudorPytilauQhcraeseRetutitsnI)9)3アプローチなどのカラム特性評価テストを通じて経験的に比較できます。これらは、明確に定義された分子プローブを使用して、特定の分析固定相保持メカニズムを評価します。このようなアプローチにより、固定相の化学的性質の有意義かつ信頼性の高い比較が可能になることが広く実証されています。0)4図4Aは、4つのrotnavA®ECA®eroCartlUソリッドコア固定相のタナカ特性データを示しています。個別のakanaTパラメータの包括的な説明は参考文献04に記載されています。このデータはこれらのカラムによって提供される異なる選択性を明確に裏付けており、各固定相が所定の分離に対して実質的に異なる選択性を提供できることを示しています。図4Bは、同じ分析条件を使用して4つの固定相に注入された単純なテスト混合物を示しています。4つの固定相すべてでこれらの成分を分離できましたが、溶出順序とピーク間隔には明らかな違いが観察されました。さらに、独自のカプセル化技術を使用して製造されたCrepuS81およびlyxeHlynehPrepuS固定相によって、さらなるメソッド開発機能が提供されます。これら2つの固定相の化学的性質は、より広範囲の移動相Hpと互換性があるため、高Hpと低Hpの両方で分離を実行できます。1表:小分子分析用のrotnavA®ECA®ソリッドコアカラム。PhaseUSPListingStationaryphasechemistryEnd-cappingParticlesize(µm)Poresize(Å)Surfacearea(m2/g)Carbonload(%)pHrangeUltraCoreSuperC18L1OctadecylEncapsulated2,5951307,01.5-1151005,4UltraCoreSuperPhenylHexylL11Phenyl-HexylEncapsulated2,5951304,61.5-1151003,6UltraCoreC18L1OctadecylYes3,5951158,22-9UltraCorePhenylhexylL11Phenyl-HexylYes3,5951156,22-9UltraCoreBiphenylL11BiphenylYes3,5951156,52-9UltraCoreC18-AmideL60C18-AmideYes3,5951155,52-9CHROMATOGRAPHYSOLUTIONS
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