Technical note J.T.Baker Viral Inactivation Solution 110による タンパク質治療薬の安定性 3(3)

TechnicalNote|avantorsciences.com3-20020406080100120140160180010203040506070min-50050100150200250010203040506070RESULTS1.ImpactofdetergentexposuretopurifiedproteinTable3showstheSECresultofincubationofIgG1andFabwiththedetergent.Controlsamplesarepreparedatthesameconcentrationofproteinwithouttheadditionofdetergent.Theresultshowsthere’snoimpactonpurityofbothproteinsaftertheincubationwith1%ofViralInactivationSolution110atroomtemperature.2.ImpactofdetergentexposuretoproteininCCCFGraph1showstheSECresultofincubationofIgG1andFabwithViralInactivationSolution110inCCCF.OverlayingchromatogramresultshowsthereisnoimpactontheproteinfromtheincubationoftheCCCFwiththe1%ViralInactivationSolution.Graph1.SECresultofincubationofIgG1inCCCFandFabinCCCF.OverlayofT0and1hourincubationofsampleandcontrolshowsnosignificantdifference.(a)IgG1CCCF(b)FabCCCTABLE3:SECresultofincubationofIgG1withViralInactivationSolution110Series1FabCCCFwithoutdetergentatT0Series2FabCCCFwithoutdetergentafter1hourSeries3FabCCCFwithdetergentatT0Series4FabCCCFwithdetergentafter1hourSeries1IgG1CCCFwithoutdetergentatT0Series2IgG1CCCFwithoutdetergentafter1hourSeries3IgG1CCCFwithdetergentatT0Series4IgG1CCCFwithdetergentafter1hourNormalizedabsorbanceNormalizedabsorbanceSeries2Series3Series1Series4Series1Series2Series3Series4IgG1Fab1mg/ml5mg/ml10mg/mlFab1mg/mlIncubationtimeSamplewith1%ViralInactivationSolutionControlSamplewith1%ViralInactivationSolutionControlSamplewith1%ViralInactivationSolutionControlSamplewith1%ViralInactivationSolutionControlT094.0%94.8%95.5%94.8%87.5%87.5%97.0%98.2%1hr95.1%95.7%95.2%95.3%87.6%87.4%98.0%98.2%2hrs95.5%94.9%95.2%95.4%87.7%87.5%98.0%98.3%TechnicalNote|avantorsciences.com3-2024681012141618010203040506070min-50050100150200250010203040506070RESULTS1.ImpactofdetergentexposuretopurifiedproteinTable3showstheSECresultofincubationofIgG1andFabwiththedetergent.Controlsamplesarepreparedatthesameconcentrationfproteinwithouttheadditionofdetergent.Theresultshowsthere’snoimpactonpurityofbothproteinsaftertheincubationwith1%ofViralInactivationSolution110atroomtemperature.2.ImpactofdetergentexposuretoproteiinCCCFGraph1showstheSECresultofincubationofIgG1andFabwithViralInactivatioSolution110nCCCF.OverlayingchromatogramresultshowsthereisnoimpactontheproteinfromtheincubationoftheCCCFwiththe1%ViralInactivationSolution.Graph1.SECresultofincubationofIgG1inCCCFandFabinCCCF.OverlayofT0and1hourincubationofsampleandcontrolshowsnosignificantdifference.(a)IgG1CCCF(b)FabCCCTABLE3:SECresultofincubationofIgG1withViralInactivationSolution1101houtdetergentatT02houtdetergentafter1hourSeries3FabCCCFwithdetergentatT0Series4FabCCCFwithdetergentafter1hour1houtdetergentatT02houtdetergentafter1hourSeries3IgG1CCCFwithdetergentatT0Series4IgG1CCCFwithdetergentafter1hourNormalizedabsorbanceNormalizedabsorbance23Series1Series412Series3Series4IgG1Fab1mg/ml5mg/ml10mg/mlFab1mg/mlIncubationtimeSamplewith1%ViralInactivationSolutionControlSamplewith1%ViralInactivationSolutionControlSamplewith1%ViralInactivationSolutionControlSamplewith1%ViralInactivationSolutionControlT094.094.8.594.8.5.5971r.195.7.3.6.4.22hrs95.5%94.9%95.2%95.4%87.7%87.5%98.0%98.3%表３は、IgG1およびFabと界面活性剤とのインキュベーションのSEC結果を示しています。対照サンプルは、界面活性剤を添加せずに同じ濃度のタンパク質で調整されます。この結果は、室温で1％のウイルスの不活化溶液110とインキュベートした後、両方のタンパク質の純度に影響がないことを示しています。結果グラフ1は、CCCF中でIgG1およびFabをウイルス不活化溶液110とインキュベートした場合のSEC結果を示しています。クロマトグラムの結果を重ね合わせると、CCCFと1％ウイルス不活化溶液とのインキュベーションによるタンパク質への影響がないことがわかります。グラフ1．CCCFでのIgG1とCCCFでのFabのインキュベーションのSEC結果T0とサンプルとコントロールの1時間のインキュベーションを重ね合わせると、有意な差はみられません。１．精製タンパク質への界面活性剤暴露の影響２．CCCFにおける界面活性剤のタンパク質への暴露の影響表3：ウイルス不活化溶液110とgGをインキュベーション後のSEC結果