Technical note J.T.Baker Cell Lysis Solutionによる 細胞溶解効率について 3(3)

vwr.com | Technicalnote3Figure2:ViabilityofHEK293Fcellsfollowingcelllysisusingvariousdetergents.Lysingagentmixedincellmediafor1hourbeforecellextraction.J.T.BAKER®CELLLYSISSOLUTIONEFFICIENCYEfficiencyoflysisofExpi293FandSF9cellsbyJ.T.Baker®CellLysisSolutionandTritonX-100wasdeterminedatvariousconcentrationsofdetergentasdescribed.Cellviabilitypriortolysiswasmeasuredforbothcelltypes.Cellviabilityasafunctionoflysissolutionconcentrationwasdeterminedfollowing1hourofincubationusingtheViCellcellviabilityanalyzer.ResultsofcellviabilityareshowninFigure1.ThepercentageofcellslysedforbothExpi293FandSF-9cellswascomparableforJ.T.Baker®CellLysisSolutionandTritonX-100.Completelysiswasachievedabove0.1%(v/v)finaldetergentcelllysisconcentration,whichisthetypicaldetergentconcentrationusedforcelllysis4-8.CelllysisofHEK293FcellswithJ.T.Baker®CellLysisSolutionattherecommended1:100dilutioncomparedtocommonlyusednon-ionicdetergentsat0.1%finaldetergentconcentrationissummarizedinFigure2.ThedatashowsthatlysisofHEK293FcellsbyJ.T.Baker®CellLysisSolutioniscomparabletoTritonX-100andsuperiortoothercommonlyusednon-ionicdetergentsat0.1%and0.5%.ForCompetitorB,completecelllysiswasnotachievedattheconcentrationstested,whereasTritonX-100andJ.T.Baker®CellLysisSolutionshowedamarkedlossincellviabilityatbothconcentrations.CellViability,%CompetitorProductACompetitorProductBTritonX-100CellLysisSolution100806040200JTBaker®CellLysisSolutionおよびTritonX-100によるExpi293FおよびSF9細胞の溶解効率が記載されているさまざまな界面活性剤濃度で測定しました。両方の細胞タイプについて溶解前の細胞生存率を測定しました。溶解溶液濃度の関数としての細胞生存率は、ViCell細胞生存率アナライザーを使用して1時間のインキュベーション後に測定しました。細胞生存率の結果は図1に示します。Expi293F細胞とSF9細胞の両方で溶解された細胞の割合は、JTBaker®ClLysisSolutionとTritonX-100で同等でした。完全な溶解は、最終界面活性剤細胞溶解濃度0.1％(v/v)以上で達成されました。これは細胞溶解に使用される典型的な界面活性剤濃度です。（⁰⁴-⁰⁸）JTBaker®CellLysisSolutionの細胞溶解効率推奨される1:100希釈のJTBaker®CellLysisSolutionを使用したHEK293F細胞の細胞溶液と最終界面活性剤濃度0.1％の一般的に使用される非イオン性界面活性剤との比較を図2にまとめました。データはJTBaker®CellによるHEK293F細胞の溶解率を示しています。CellLysisSolutonはTritonX-100に匹敵し、0.1％および0.5％で一般的に使用される他の非イオン性界面活性剤よりも優れています。競合他社Bの場合、テストした濃度では完全な細胞溶解は達成されませんでしたが、TritonX-100およびJTBaker®CelllysisSolutionは両方の濃度で細胞生存率の顕著な低下を示しました。図2：さまざまな界面活性剤を使用した細胞溶解後のHEK293F細胞の生存率。細胞抽出前に、溶解剤を細胞培地に1時間混合します。